本文面向生物制药、分析检测及纯化工艺人员，系统介绍离子交换色谱的原理、选型与方法开发。核心看点：先根据目标物电荷与pI选择阳离子或阴离子交换，并理解pH、电导和配体密度如何影响保留；再通过低电导上样、盐或pH梯度洗脱及二维条件筛选提升分离效果；同时覆盖蛋白、核酸、无机离子等应用，并讨论膜层析、连续色谱与PAT等趋势及局限。关键词：离子交换色谱、电荷差异、蛋白纯化、梯度洗脱、方法开发。